彼得·帕克在童年时双亲离奇失踪，由本叔和梅姨抚养长大。一次在学校的科学展览上，他被一只转基因蜘蛛咬伤，从此拥有了超乎常人的能力。彼得开始利用这些能力打击犯罪，化身超凡蜘蛛侠守护纽约。他一边要应对各种危险的反派，如蜥蜴人康纳斯博士，康纳斯为了恢复自己失去的手臂，使用了自己研发的血清，却变成了恐怖的蜥蜴怪物，在城市中大肆破坏。另一边，彼得还要处理与格温·斯黛西的感情，以及平衡自己的双重身份。在与蜥蜴人的战斗中，彼得逐渐成长，明白了能力越大、责任越大的道理，最终成功阻止了蜥蜴人的阴谋，保护了城市和市民。