《一号目标》以1947年蒋介石欲谋害毛泽东为背景展开。蒋介石密令军统局长毛人凤实施“斩首行动”，毛人凤派出王牌特工赵疯子执行刺杀毛泽东的任务。与此同时，延安保卫部侦察科长陆浩截获情报后，与战友们迅速投入到保护毛泽东的行动中。陆浩一边要揪出潜藏在延安内部的特务，一边要应对赵疯子的步步紧逼。在紧张的较量中，双方斗智斗勇，陆浩凭借着智慧和勇气，一次次化解危机，最终成功挫败了敌人的阴谋，确保了“一号目标”毛泽东的安全，守护住了革命的希望火种。